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長肽合成

多肽固相合成（SPPS）和長肽合成的混合技術

多肽固相合成是當今流行的多肽合成方法。C端的前面一個氨基酸被耦合在活化的載體（如聚苯乙烯）上。樹脂既可作為c端保護基，同時又可將增長的肽產(chǎn)品從在合成過程中形成的反應混合物中快速分離出來。

我們經(jīng)常有客戶對超長多肽的合成咨詢，比如長度在100到200個氨基酸的長肽的合成，其實200個氨基酸已經(jīng)是屬于蛋白質的范疇了。成功合成169個氨基酸的蛋白證明我們的合成技術在現(xiàn)有的技術平臺是完全能勝任長肽的合成的，我們的技術平臺PeptideSyn通常都是合成50個氨基酸以下的多肽，但是通過我們對多肽鏈接技術的改造和針對長肽的，我們現(xiàn)在能成功合成蛋白質長度的多肽。

通過化學合成的辦法獲得長達100到200個氨基酸的蛋白，比其它方法相比要跟快捷和便宜，況且化學合成的蛋白是按照氨基酸的順序來進行的，不會出現(xiàn)錯誤或者變異的情況。化學合成還能加入一些別的辦法不能進行的修飾，比如取代常規(guī)氨基酸為D型氨基酸，增加某個位點的磷酸化或者甲基化。化學合成還不需要額外增加純化蛋白用的標簽比如6HIS或者FLAG等。在蛋白表達的方法上，反而是基因合成，質粒構建，蛋白表達和純化等工作占據(jù)了絕大多數(shù)的時間和成本。因此長肽的化學合成方法是廣大科研工作值得嘗試的途徑。

固相合成和混合技術策略

優(yōu)勢

長肽被快速合成：Fmoc/Boc法
生產(chǎn)周期短
工藝自動化和高效性
沒有需分離的中間體

劣勢

原料成本高，易造成原料浪費。
雜質較復雜：包括有插入、截斷、刪除、被修改或未被修改的氨基酸。

成功案例 1

成功的在四周內(nèi)合成了一個169個氨基酸的多肽 (M.W. 18716.41, 83% purity)。多肽合成的成功率取決于多肽的序列，有時候150個氨基酸的多肽有時候比一個70個氨基酸的多肽更容易合成。通常利用Boc/Bzl進行氨基酸的保護對于長的多肽會比較有幫助，由于多肽產(chǎn)品的切割需要比較強的酸比如TFMSA和HF，所以在去保護的時候有些有活性的中間產(chǎn)物很容易和一些氨基酸進行反應，我們對原料和酸堿的選擇能很大程度的解決這些問題，因此我們的PeptideSyn技術平臺對于長肽的合成起到了突破性的作用。